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有哪些微生物會污染培養(yǎng)的細(xì)胞?

 更新時間:2024-04-08 點擊量:785

由于體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力,而在培養(yǎng)基中加抗生素的抗污染能力也是有限的,一般在細(xì)胞受到污染早期或污染較輕時,能及時處理并除去污染物,部分細(xì)胞還有可能得到挽救。

通常情況下,會有哪些微生物會污染培養(yǎng)的細(xì)胞?

一、霉菌污染

污染的多是曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物,一般肉眼可見,較易被發(fā)現(xiàn),短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁。
倒置顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲,并漂浮在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長。

二、酵母菌污染

酵母到處存在,并能在合適的環(huán)境中快速生長。酵母污染很容易觀察到,培養(yǎng)物變渾濁,尤其在后期。一般PH值變化很小,嚴(yán)重時,PH值升高。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒,有些會長出較小顆粒。

三、耐藥細(xì)菌污染

細(xì)菌污染較常見的有大腸桿菌,白色葡萄球菌,假單孢菌等。加用抗菌素的培養(yǎng)液可預(yù)防和排除個別一般少量細(xì)菌的污染。一旦發(fā)生細(xì)菌污染很容易發(fā)現(xiàn),多數(shù)情況下培養(yǎng)液短時間內(nèi)變黃,表明有大量酸性物質(zhì)產(chǎn)生,出現(xiàn)明顯渾濁現(xiàn)象;有時靜置的培養(yǎng)液起初不混,但稍加震蕩,就有許多混濁物漂起。

倒置顯微鏡下觀察,有時在細(xì)胞表面及周圍有大量細(xì)菌存在,細(xì)胞停止生長并有中毒表現(xiàn),必要時可取少量培養(yǎng)液涂片染色檢查以明確細(xì)菌種類。

四、支原體污染

支原體是一種大小介于細(xì)菌和病毒之間(小直徑0.2um)并獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細(xì)胞壁形態(tài)呈高度多形性,可為圓形、絲狀或梨形。

支原體形態(tài)多變,在光鏡下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。多數(shù)支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6-8.0),對酸耐受性差。對熱比較敏感,對一般抗生素不敏感。

支原體污染細(xì)胞后,培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁。多數(shù)情況下細(xì)胞病理變化輕微或不顯著,細(xì)微變化也可由于傳代、換液而緩解,因此易被忽視。但個別嚴(yán)重者,可致細(xì)胞增殖緩慢,甚至從培養(yǎng)器皿脫落。

為確定有無支原體污染可做如下檢測:熒光染色法支原體檢測、PCR法支原體檢測、qPCR支原體檢測、電鏡檢查。

五、黑膠蟲污染

黑膠蟲污染細(xì)胞后,細(xì)胞生長會變緩慢,與細(xì)胞共生,競爭營養(yǎng),培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁。細(xì)胞間隙內(nèi)出現(xiàn)小黑點,會不斷變多,且對各類抗生素?zé)o效,顯微鏡下可以看到小黑點原地跳動,細(xì)胞狀態(tài)變化會因為傳代、換液而有所改善,因此易被忽視。但個別嚴(yán)重者,可致細(xì)胞空泡化,出現(xiàn)很多細(xì)胞碎片等。

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