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聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑

簡要描述:CHO高效瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑,PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。

  • 產(chǎn)品型號:型號齊全
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2023-07-08
  • 訪  問  量:2239
詳情介紹

產(chǎn)品名稱:聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑

產(chǎn)品簡介:
聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑(PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine):PEI Prime是以一種陽離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負(fù)電的DNA牢固結(jié)合,并賦予凈陽離子電荷,使DNA進(jìn)入細(xì)胞。PEI Prime是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑,利用PEI的特性旨在實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)量,可重復(fù)性和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)。


應(yīng)用范圍:

PEI轉(zhuǎn)染試劑能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞系,包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。此外,PEI是用于HEK293和CHO懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑。PEI轉(zhuǎn)染試劑是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的合適選擇,包括重組蛋白,抗體和病毒。



PEI線性轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品優(yōu)勢:

1. 低毒,高效

2. 操作簡單,高性價(jià)比

3. 可提供可靠、具有可重復(fù)性的轉(zhuǎn)染結(jié)果

4. 適用于快速、高通量轉(zhuǎn)染流程


轉(zhuǎn)染步驟:

-以HEK293貼壁細(xì)胞為例,步驟如下:

1. 細(xì)胞接種:細(xì)胞密度2-6 x106 cells/mL。

2. 質(zhì)粒的準(zhǔn)備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每106個細(xì)胞稀釋1.0 ug pDNA。

3. PEI的準(zhǔn)備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每106個細(xì)胞稀釋3.0 ug PEI Prime,混勻。

4. 通過快速,短暫渦旋或顛倒數(shù)次試管,將pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。

5. 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。

6. 一邊旋轉(zhuǎn)板,一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細(xì)胞中。

7. 于37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。




轉(zhuǎn)染的優(yōu)化:

為達(dá)到高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性的理想結(jié)果,可以進(jìn)行如下優(yōu)化:

參數(shù)

范圍

PEI濃度

3.50-6.50mg/(L final culture)

DNA濃度

0.75-1.5mg/(L final culture)

PEI/DNA混勻時(shí)間

5.0-15.0minutes


與市場同類品牌的PEI轉(zhuǎn)染效率的對比:

使用PEI Prime(PEI:DNA濃度比3:1)或某國外品牌PEI,用CMV-SEAP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染20ml 含HEK293懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)物。 轉(zhuǎn)染后5天,使用磷酸酶報(bào)告染料和UV / Vis檢測SEAP表達(dá)水平。數(shù)據(jù)表示占某國外品牌PEI的SEAP表達(dá)水平的百分比。結(jié)果顯示我們的PEI Prime 的轉(zhuǎn)染效率比國外同類廠家高出40%。


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