產品名稱：原代食管癌*培養(yǎng)基（Human Esophagus Carcinoma Cell Medium）
產品說明：原代食管癌*培養(yǎng)基（Human Esophaqus Carcinoma Cell Medium）是一種為促進食管癌原代細胞體外生長而設計的培養(yǎng)基。它是一種無菌的液體混合系統(tǒng)，含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質。培養(yǎng)基基于碳酸氫鹽的緩沖體系，在5%CO2/95%空氣的培養(yǎng)箱中平衡時，pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方可以提供一個理想平衡的營養(yǎng)環(huán)境，選擇性地促進體外人食管鱗癌原代細胞的生長。

產品優(yōu)勢：
(1) 培養(yǎng)成功率高

(2) 體外持續(xù)擴增

(3) 保持腫瘤原始病理特征

(4) 藥敏結果宇臨床數(shù)據(jù)接近

使用說明
?使用前準備
（1）DMEM/F12培養(yǎng)基稀釋后的基質膠（Corning#356231）（100倍稀釋）。
（2）15mL無菌離心管、移液器、移液管、無菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺中紫外照射30min。
（3）提前30min從4℃冰箱取出*培養(yǎng)基平衡至室溫。
?食管癌原代細胞培養(yǎng)
（1）至少提前半小時使用稀釋后的基質膠預鋪培養(yǎng)瓶/板，使用前吸干基質膠，用稀釋液潤洗一遍。
（2）將分離并計數(shù)后的細胞懸液參考表1中細胞數(shù)量接種于培養(yǎng)瓶/板，補加*培養(yǎng)基至所需體積，輕輕搖晃混勻，表面消毒后置培養(yǎng)箱，37℃、5%CO2條件培養(yǎng)。
（3）原代細胞初次接種后2-3天內勿動（利于細胞貼壁），第一次換液建議換半液。

?食管癌原代細胞傳代
（1）鏡下觀察細胞形成克隆，且匯合度達到80~90%時即可傳代。
（2）培養(yǎng)箱中取出細胞，棄舊培養(yǎng)液，加入適量0.05%胰酶，37℃孵育，5min后拿出輕拍培養(yǎng)瓶/板側面，顯微鏡下觀察細胞消化情況。
（3）細胞消化至細胞變圓并開始脫落時用終止培養(yǎng)基終止消化，并將細胞轉移至離心管中，1500rpm離心3 min。
（4）棄上清，以1-2mL*培養(yǎng)基重懸細胞，活細胞計數(shù)，將細胞懸液按適合的細胞密度接種于培養(yǎng)瓶/板，補加*培養(yǎng)基至所需體積，輕輕搖晃混勻，表面消毒后置培養(yǎng)箱，37℃、5% CO2條件培養(yǎng)。
注意事項：
1.本產品在使用前需平衡至室溫。
2.用產品時應注意無菌操作，避免污染。
3.本產品中不含血清，含原代細胞專用抗生素，無需額外添加抗生素。
4.為保持本產品的理想使用效果不宜將其過夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。5.請于保質期內使用本產品，超出保質期，必須放棄使用。
6.樣本需為食管鱗德術中樣本，且腫瘤細胞比例越高（至少>50%），培養(yǎng)成功率越高，不推薦用于少量樣本（如內鏡和循環(huán)腫瘤細胞）的培養(yǎng)。
7.本產品僅用于科研用途，不能用于體外診斷。