一、試劑盒簡(jiǎn)介

EZBioscience microRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒在一步分析中使用了Poly(A)拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的方法來合成miRNA的第一鏈cDNA。通過使用大腸桿菌聚(A)聚合酶通過添加聚(A)延伸成熟轉(zhuǎn)錄本的3末端來修飾總RNA中的成熟miRNA。然后，使用Oligo(dT)通用標(biāo)簽引物對(duì)修飾的miRNA進(jìn)行通用逆轉(zhuǎn)錄，以合成所有miRNA的第一條鏈cDNA。該試劑盒可與microRNA探針qPCR試劑盒(目錄號(hào):EZB-miProbe/EZB-miProbe-R0/EZB-miProbe-R1/EZB- miProbe-R2)一起使用。

該試劑盒包含三管試劑:gDNA去除劑，miRNART酶混合物和4xmiRNART緩沖液。

其中，gDNA去除劑主要包括濃縮的DNase和緩沖液。它可以降解超過95%的殘留基因組DNA，僅需在室溫(19~27℃)下反應(yīng)5分鐘即可，從而大大降低了對(duì)結(jié)果的干擾。

miRNART酶混合物主要包含大腸桿菌Poly(A)聚合酶，逆轉(zhuǎn)錄酶和RNase抑制劑。大腸桿菌Poly(A)聚合酶不僅具有高效的Poly(A)拖尾反應(yīng)效率，而且可以特異性識(shí)別成熟的單鏈miRNA，從而避免了具有雙銷結(jié)構(gòu)的miRNA前體的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。具有很強(qiáng)的抗干擾能力和放大能力。

4xmiRNA RTBuffer試劑包含電+Polv(A)拖星反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的所有原材料和引物包括Olipo(dT)

通用標(biāo)簽引物，緩沖液和dNTPs，并且經(jīng)過仔細(xì)優(yōu)化以確保Polv(A)高效地進(jìn)行拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

二、產(chǎn)品組分

三、保存條件

-20℃保存

四、EZBioscience microRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒特點(diǎn)

1加尾法一步快速高效率將所有miRNA逆轉(zhuǎn)錄為可直接檢測(cè)的cDNA。

2.無需設(shè)計(jì)miRNA特異性引物，僅需30分鐘即可完成microRNA的逆轉(zhuǎn)錄，簡(jiǎn)單高效率。

3.需要與EZB-miProbe-Ro.EZB-miProbe，EZB-miProbe-R1EZB-miProbe-R2配套使用。